铁皮石斛种子组培快繁技术专题配音

铁皮石斛种子组培快繁技术

铁皮石斛为兰科石斛属多年生附生草本植物，因表皮呈铁绿色而得名，喜温暖湿润气候和半阴半阳的环境。

铁皮石斛是一种名贵的中药材，以其茎入药，为石斛之极品，曾被古书记载称为中华九大仙草之首，可见其具有极高的药用价值。但近年来人们对野生资源的过度采掘，使其陷入濒临灭绝的边缘。

随着其市场需求日益增长，而花粉粒大小无胚乳的铁皮石斛的种子在自然条件下无法萌发，规模化人工种植为了解决日益增长的市场需求和保护野生资源之间的矛盾，铁皮石斛的组培快繁技术应运而生，其中种子培养对于其种苗的大规模快速繁殖是非常重要的途径。下面我们就来讲一讲铁皮石斛种子的组培快繁技术。

培养条件5s

培养基

配制培养基，首先需称取药品配制培养基母液，将称量好的琼脂和蔗糖加热溶解，然后根据需要准确量取母液，定容，调整PH，装瓶，进行高压灭菌,将灭好菌的培养基放入无菌室备用。铁皮石斛种子组织培养培养基的配方为

诱导培养基

增殖培养基

生根壮苗培养基

环境条件字幕

温度培养室温度为252。

光照20002500勒克斯  光照10小时每天

技术流程

材料准备

采集未开裂的铁皮石斛蒴果种荚，将铁皮石斛的蒴果先用自来水冲洗干净，用75的酒精擦拭消毒，之后于超净工作台上用0.的升汞溶液消毒5min后，用无菌水冲洗5次，沥干备用。

诱导培养

取处理好的铁皮石斛蒴果，接种时，将经过表面消毒的蒴果放在无菌的不锈钢盘上，切除头尾部分并弃去，然后将蒴果沿纵轴切开，露出种子，将蒴果十字状用消毒镊子轻轻敲打蒴果让种子均匀的撒播培养基表面。

将铁皮石斛的种子接种在诱导培养基上，培养约15天后，用肉眼可观察到在培养基表面有浅绿色的小团粒。这些浅绿色颗粒系原球茎体，或为已萌发出子叶和第1片真叶而形成的无菌实生小苗。

再经过2025天的培养，大部分原球茎体已萌发，形成了具12片真叶的幼苗。

这些幼苗和原球茎体相互堆挤在一起，占满了初代培养基整个表层及表层上约1.5厘米厚的空间。此时，铁皮石斛无菌材料的建立及种子诱导培养阶段即告完成。

增殖培养

诱导培养完成后，及时将无菌实生小苗或原球茎体转接到新配制的增殖培养基上进行培养，把上述获得的小苗及原球茎体继续转接在增殖培养基上，100 d 左右可发育成1.01.5 cm 高的小苗，每隔 d 继代1 次，每次可增殖36倍。

生根壮苗培养

将经过壮苗培养的铁皮石斛组培苗，在超净工作台上打开瓶盖，将每瓶中的所有培养物用无菌镊子全部转移到无菌的钢盘上，从中挑选出比较粗壮的无菌苗个体转接到新配制的生根培养基上,小于3.0 cm 的丛生苗继续转接在增殖培养基上继续增殖培养，高于3.0 cm 的丛生苗转入生根培养基上进行生根培养。

经过60左右生根培养，可以获得理想的发根植株，植株高度可达58厘米，每根根数35 条根长46 cm，即可出瓶炼苗。

炼苗及移栽

符合要求的组培苗，即可进行炼苗，方法为

将待炼苗的材料放置于欲移栽的环境，不开盖保持天，覆盖遮阳网

之后，揭开遮阳网，开盖再炼苗23天

使铁皮石斛组培苗逐步适应外界的环境温差湿度差以及微生物环境。

炼苗之后进行移栽采用发酵树皮及石子配比基质移栽小苗，将瓶苗出瓶，清洗掉根部琼脂，选择无病健壮大小均匀的苗进行定植，将处理好的按每丛35株，株距10厘米行距13厘米的规格种植于基质上，定植时以基质根部完全覆盖为宜，栽种过深，基部的叶子容易腐烂引起病害，栽种过浅，根基部生长暴露在空气中，不利于新根新芽的生长。

铁皮石斛种植时根系向四周均匀展开，将基质填充根部基部必须露出，移栽后隔5天再浇水效果较好，否则易造成烂根。之后30天内每隔1天喷雾1次，水量不宜过多，期间勿施肥，待小苗恢复正常生长后开始开始常规的水肥管理，之后便可以培育出铁皮石斛成品植株。